Introdución: Mycoplasma hominis y Ureaplasma urealyticum aunque pueden ser parte de la microbiota normal de la vagina, también pueden estar asociadas con alteraciones del tracto urogenital. Objetivo: Caracterizar  aspectos  microbiológicos de la infección por Mycoplasma hominis y Ureaplasma spp en mujeres atendidas en  las consultas de infertilidad y ginecología del Hospital Universitario Ginecoobstétrico "Mariana Grajales". Método: Se realizó un estudio descriptivo, la población estuvo constituido por 2265 muestras endocervicales de  pacientes  que acudieron al laboratorio entre enero del 2010 a diciembre del 2013. Resultados: La positividad del estuche comercial Mycoplasma System Plus en muestras endocervicales fue de 26.4  %. El predomino del crecimiento de los micoplasmas  fue leve  de un 55.4% y la  frecuencia de aislamientos  en la especie de Ureaplasma spp fue de 75%. Para Ureaplasma spp los antimicrobianos más resistentes fueron ofloxacina y tetraciclina  mientras que Mycoplasma hominis  presentan mayor resistencia  a  claritromicina eritromicina, y azitromicina por encima del 50%. Para la asociación de   Mycoplasma hominis y Ureaplasma spp.  la resistencia fue mayor para eritromicina y claritromicina. Conclusiones: La positividad del estuche comercial  Mycoplasma System Plus en las muestras endocervical no fue alta.  El crecimiento  leve de  los micoplasmas urogenitales  predominó. Ureaplasma spp. fue la especie más identificada y la prueba de susceptibilidad  denotó mayor sensibilidad antimicrobiana mientras que  Mycoplasma hominis  y la  asociación de   Mycoplasma hominis y Ureaplasma spp.  presentaba mayor resistencia. Recomendación: Incluir  la búsqueda de estos microorganismos como prueba rutinaria en la práctica clínica diaria en los servicios de infertilidad y ginecología.